RB-Dextran 羅丹明B標記葡聚糖的合成方法及其在熒光成像中的應用

RB-Dextran 是一種將經典熒光染料 Rhodamine B 標記于葡聚糖分子上的功能性探針材料。該材料結合了葡聚糖的高親水性、生物相容性和羅丹明 B 的明亮紅色熒光，在多種生物醫(yī)學研究中被廣泛應用，包括血管滲透性評估、細胞吞噬實驗、組織屏障分析和藥物遞送行為示蹤等。

一、基本信息

中文名：RB-葡聚糖 / 羅丹明 B 標記葡聚糖

英文名：RB-Dextran / Rhodamine B-Dextran

別稱：Rhodamine B熒光葡聚糖、紅色熒光標記葡聚糖、RhoB-Dextran

核心結構：天然葡聚糖（Dextran）通過化學偶聯方式共價接枝羅丹明 B 熒光染料（Rhodamine B）

二、光學性質

激發(fā)波長（λ_ex）：540–555 nm

發(fā)射波長（λ_em）：570–590 nm

熒光顏色：明亮紅色

熒光類型：強熒光，光穩(wěn)定性較好，適合長時間觀察

激發(fā)光源適配性：適用于常規(guī)綠色激光（如 543 nm 或 561 nm）或綠光濾片（FITC/RhB 通用濾片）

RB-Dextran 的熒光波段位于可見光區(qū)紅色范圍，適合細胞顯微成像、熒光定量分析和組織分布檢測。相比 CY 類近紅外染料，RB 更適用于淺層組織和體外實驗分析。

三、物化屬性

分子量（Dextran）：常見規(guī)格為 3 kDa、10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa

物理形態(tài)：粉紅色至粉紅紫色粉末

溶解性：高度水溶性，適用于水、PBS、細胞培養(yǎng)基等

穩(wěn)定性：干燥避光狀態(tài)下可穩(wěn)定保存一年以上

連接方式：Rhodamine B 異硫氰酸酯（Rhodamine B isothiocyanate, RITC）與葡聚糖上的氨基反應形成穩(wěn)定硫脲鍵

四、合成方法簡述

葡聚糖氨基化：通過氯乙酸、EDA（乙二胺）或 ADH（己二酰肼）等方法在葡聚糖上引入氨基基團（-NH?）；

標記反應：Rhodamine B isothiocyanate（RITC）與氨基化葡聚糖在 pH 8.3–9.0 條件下反應；

純化步驟：采用透析或層析去除游離染料分子；

凍干保存：純化產物凍干后避光保存為成品 RB-Dextran。

五、主要應用領域

細胞吞噬與內吞實驗

可作為示蹤大分子探針用于巨噬細胞吞噬活性評估。

血管通透性與屏障功能分析

應用于腦血管屏障（BBB）、腸上皮屏障、肺泡屏障等完整性檢測。

組織分布與灌注示蹤

可用于小鼠或大鼠活體灌注示蹤實驗，標記血管或特定組織通路。

藥物遞送系統(tǒng)評估

用于模擬藥物在微環(huán)境中的擴散、滲透、釋放行為。

水凝膠或載體系統(tǒng)擴散研究

作為模型探針用于水凝膠、多孔材料、微球等載體體系的分子滲透與擴散機制研究。

熒光微血管灌注成像

可通過心臟灌注將 RB-Dextran 注入血液系統(tǒng)，獲取清晰微循環(huán)影像。

六、優(yōu)勢特點

? 明亮紅色熒光，易于顯微鏡觀察

? 高水溶性和優(yōu)良生物相容性

? 適用于多種體內外系統(tǒng)示蹤

? 多種分子量可選，適應性廣

? 合成過程溫和，標記度可調

七、代表性文獻與應用實例

Burgess, A. et al. Measuring blood-brain barrier permeability using Rhodamine B-labeled dextran. J. Neurosci. Methods, 2019, 324, 108312.
→ 使用 RB-Dextran 評估小鼠腦血管屏障功能完整性。

Chen, C. et al. Monitoring intestinal barrier disruption using Rhodamine B dextran tracer. Front. Physiol., 2021, 12, 642431.
→ 應用于 DSS 誘導的結腸炎模型中腸道通透性分析。

Zhao, Y. et al. Hydrogel-mediated release studies using Rhodamine B-dextran model probes. Carbohydrate Polymers, 2022, 291, 119606.
→ 使用 RB-Dextran 研究可降解凝膠材料中的大分子釋放行為。

Wang, X. et al. Evaluation of macrophage phagocytosis with Rhodamine B dextran. Cytotechnology, 2020, 72, 547–556.
→ 用于評估不同免疫刺激條件下的巨噬細胞內吞活性。

八、使用與保存建議

推薦濃度：常用于 0.1–10 mg/mL，視具體實驗而定；

溶液穩(wěn)定性：4°C 避光可保存 3–5 天，建議現配現用；

粉末儲存：–20°C 干燥避光保存，有效期 >12 個月；

注意事項：避免強酸強堿及強光照射，避免反復凍融。

總結

RB-Dextran 結合了天然葡聚糖的良好生物相容性與羅丹明 B 熒光染料的顯著紅色熒光信號，是一種常用于生物屏障研究、藥物釋放評估、組織示蹤和細胞攝取分析的熒光探針。其適配性強、穩(wěn)定性好，在組織灌注、屏障滲漏與胞吞路徑追蹤等研究中具有廣泛應用價值。

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