TRITC-Dextran 四甲基羅丹明標(biāo)記葡聚糖的制備工藝、光譜特性及生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用

TRITC-Dextran 是一種將紅色熒光染料 TRITC（四甲基羅丹明異硫氰酸酯）標(biāo)記到天然葡聚糖上的熒光探針材料。它具有良好的水溶性、生物相容性和穩(wěn)定熒光特性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)、血管滲透性分析、生物屏障研究、組織成像與藥物釋放等領(lǐng)域。

一、基本信息

中文名：TRITC-葡聚糖 / 四甲基羅丹明標(biāo)記葡聚糖

英文名：TRITC-Dextran (Tetramethylrhodamine isothiocyanate-Dextran)

別稱：四甲基羅丹明異硫氰酸酯-葡聚糖、紅色熒光葡聚糖、TMR-Dextran、Rhodamine T-Dextran

結(jié)構(gòu)組成：天然葡聚糖（Dextran）通過共價(jià)鍵連接四甲基羅丹明異硫氰酸酯（TRITC）

二、光學(xué)性質(zhì)

激發(fā)波長（λ_ex）：540–555 nm

發(fā)射波長（λ_em）：570–590 nm

熒光顏色：鮮紅色 / 橙紅色

適用激光源：常用 543 nm 或 561 nm 激光，兼容 Cy3/FITC 濾片

TRITC-Dextran 與 RB-Dextran 光譜特性相近，但具有更強(qiáng)的熒光穩(wěn)定性和更高的信噪比，適合熒光顯微鏡、共聚焦顯微成像和流式細(xì)胞分析等實(shí)驗(yàn)。

三、物化屬性

分子量（Dextran）：常見規(guī)格包括 3 kDa、10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa 等

物理形態(tài)：橙紅色至粉紅色粉末

溶解性：高度親水，易溶于水、PBS、HBSS、細(xì)胞培養(yǎng)基等

穩(wěn)定性：干燥避光儲存穩(wěn)定，溶液狀態(tài)下需低溫避光保存

連接方式：TRITC 的異硫氰酸酯基團(tuán)與葡聚糖上的氨基反應(yīng)形成穩(wěn)定的硫脲鍵

四、合成方法概述

氨基修飾：將葡聚糖通過氯乙酸、乙二胺（EDA）或己二酰肼（ADH）修飾為氨基化葡聚糖；

偶聯(lián)反應(yīng)：TRITC 在堿性緩沖液（如 pH 8.5 碳酸鹽緩沖液）中與氨基化葡聚糖反應(yīng)；

純化過程：采用透析袋或?qū)游龇ㄈコ�未結(jié)合的游離染料；

干燥保存：冷凍干燥后制得橙紅色粉末狀產(chǎn)物。

五、主要應(yīng)用領(lǐng)域

細(xì)胞吞噬與內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)

用于檢測巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞對大分子的攝取能力。

血管滲透性與組織屏障研究

TRITC-Dextran 被廣泛用于腦血管屏障（BBB）、腸道屏障、肺泡屏障等研究。

體內(nèi)/體外熒光成像

通過靜脈注射或組織灌注，實(shí)現(xiàn)器官或組織熒光示蹤。

藥物載體釋放機(jī)制模擬

作為模型大分子研究藥物釋放與擴(kuò)散行為。

組織灌注與微循環(huán)示蹤

應(yīng)用于小動物模型中腦、腎、肝等組織的灌注與可視化成像。

生物凝膠/水凝膠滲透研究

被廣泛用于評估凝膠材料對大分子的滲透性與屏障能力。

六、優(yōu)勢特點(diǎn)

? 強(qiáng)烈紅色熒光，成像清晰

? 高水溶性，便于制備和使用

? 多分子量可選，適配多種研究需求

? 熒光穩(wěn)定性強(qiáng)，適合長時(shí)成像

? 廣泛適用于體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)

七、代表性文獻(xiàn)與應(yīng)用實(shí)例

Zlokovic, B. V. et al. TRITC-dextran permeability as a measure of BBB integrity. J. Cereb. Blood Flow Metab., 1990, 10, 678–689.
→ 研究腦血管通透性及神經(jīng)退行性病變中的屏障破壞。

Galea, J. et al. Use of TRITC-dextran for endothelial permeability assay. Brain Res., 2007, 1147, 39–46.
→ 應(yīng)用于原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性分析。

Chen, J. et al. Hydrogel-based model to study TRITC-dextran diffusion and controlled release. Acta Biomater., 2014, 10, 3188–3196.
→ 以水凝膠包封 TRITC-Dextran 模擬大分子藥物釋放機(jī)制。

Sarin, H. et al. TRITC-dextran for monitoring of blood-brain barrier permeability in tumors. NeuroImage, 2009, 47, 45–55.
→ 腫瘤腦轉(zhuǎn)移模型中血管滲漏評估。

八、使用方法與保存建議

推薦使用濃度：0.1–10 mg/mL，依據(jù)實(shí)驗(yàn)具體需求；

溶液保存：4°C 避光保存，不建議超過 3–5 天；

粉末保存：–20°C 干燥避光條件下保存，可穩(wěn)定 1–2 年；

注意事項(xiàng)：避免與金屬離子或強(qiáng)堿性物質(zhì)長時(shí)間接觸，避免高溫；使用前可采用 0.22 μm 濾膜除菌。

總結(jié)

TRITC-Dextran 是一種高性能的紅色熒光探針，將 TRITC 染料標(biāo)記到葡聚糖分子上，兼具良好的水溶性、生物相容性和熒光穩(wěn)定性。其在血管通透性分析、細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)、組織灌注成像、藥物釋放研究等方面應(yīng)用廣泛，是生物醫(yī)藥研究中重要的熒光示蹤材料之一。 

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