cy5.5熒光染料的激發(fā)和發(fā)射波長是多少？
Cy5.5 是一種常用的 近紅外熒光染料（Near-Infrared Fluorescent Dye），屬于 Cyanine（菁染料）系列，其波長比Cy5更長，具有更深的組織穿透能力和更低的背景信號，非常適合用于 體內(nèi)成像（in vivo imaging） 和 遠(yuǎn)紅外熒光標(biāo)記 等應(yīng)用。
基本信息
名稱：Cy5.5（Cyanine5.5）
激發(fā)波長（Excitation）：約 675 nm
發(fā)射波長（Emission）：約 694–710 nm（具體取決于環(huán)境）
熒光顏色：近紅外（NIR），肉眼不可見，儀器可檢測
溶解性：水溶性或有機溶劑溶解性取決于官能團(tuán)修飾（如 NHS ester、maleimide 等）
主要應(yīng)用
體內(nèi)熒光成像（In Vivo Imaging）
由于其近紅外特性，Cy5.5信號能在動物體內(nèi)穿透深層組織，常用于小鼠成像、腫瘤靶向追蹤、藥物釋放監(jiān)測等。
免疫標(biāo)記 / 抗體偶聯(lián)
Cy5.5 可通過 NHS 酯、馬來酰亞胺等官能團(tuán)與蛋白質(zhì)、抗體、肽偶聯(lián)，用于熒光標(biāo)記或靶向檢測。
熒光探針開發(fā)
被廣泛用于構(gòu)建熒光分子探針、FRET體系和納米探針等。
DNA/RNA 探針標(biāo)記
可與寡核苷酸結(jié)合，用于雜交實驗、miRNA檢測、熒光原位雜交（FISH）等。
生物傳感器與藥物遞送系統(tǒng)成像
標(biāo)記于納米材料或載體（如脂質(zhì)體、聚合物、蛋白等）用于追蹤、釋放動力學(xué)研究。
? 優(yōu)點
低背景干擾：在NIR區(qū)間熒光干擾小，組織自身熒光弱。
組織穿透能力強：適合活體動物成像。
靈敏度高：發(fā)光強度高，適合微量靶標(biāo)檢測。
兼容FRET系統(tǒng)：可用作FRET供體或受體（與Cy7或其他遠(yuǎn)紅外染料搭配）。
注意事項
光敏性強：需避光保存，通常存于 -20°C 干燥環(huán)境。
化學(xué)穩(wěn)定性一般：特別是NHS酯類活性基團(tuán)，易水解，需現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)記密度控制：蛋白或抗體標(biāo)記時需控制熒光/蛋白比例，避免熒光淬滅或功能干擾。
?? 常見Cy5.5衍生物（供偶聯(lián)使用）
衍生物形式 | 功能用途 |
Cy5.5-NHS | 與氨基反應(yīng)，常用于蛋白/抗體標(biāo)記 |
Cy5.5-maleimide | 與巰基反應(yīng)，用于標(biāo)記含半胱氨酸的分子 |
Cy5.5-azide | Click化學(xué)反應(yīng)用 |
Cy5.5-hydrazide | 與醛/酮基反應(yīng)，適合糖基或醛標(biāo)記系統(tǒng) |
與其他近紅外染料比較（如 Cy7、Alexa Fluor 750）
染料 | 激發(fā)波長 | 發(fā)射波長 | 特點 |
Cy5.5 | ~675 nm | ~694–710 nm | 明亮、穿透力適中 |
Cy7 | ~743 nm | ~767 nm | 更長波長，穿透力更強，但信號略弱 |
AF750 | ~749 nm | ~775 nm | 商用性能強，穩(wěn)定性好 |
總結(jié)
Cy5.5 是一種高靈敏、低背景、適用于近紅外區(qū)域的熒光染料，特別適用于體內(nèi)成像和遠(yuǎn)紅外標(biāo)記。它在抗體標(biāo)記、探針設(shè)計和納米藥物可視化中具有廣泛用途。
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