文獻(xiàn):In Situ Membrane Biotinylation Enables the Direct Labeling and Accurate Kinetic Analysis of Small Extracellular Vesicles in Circulation

文獻(xiàn)鏈接：https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.1c01176

作者：Zi-Li YuYi ZhaoFan MiaoMin WuHou-Fu XiaZhuo-Kun ChenHai-Ming LiuYi-Fang ZhaoGang Chen*

摘要

DSPE-PEG-Biotin

循環(huán)小細(xì)胞外囊泡（sEVs）是天然存在的納米級(jí)膜囊泡，在細(xì)胞之間傳遞生物活性分子。傳統(tǒng)上，為了評(píng)估它們?cè)隗w內(nèi)的行為，循環(huán)的sEV必須從血液中分離出來，然后在體外用成像材料標(biāo)記，最后注射回動(dòng)物的循環(huán)中進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。

繁瑣的分離-標(biāo)記-再融合程序可能會(huì)對(duì)循環(huán)sEV的自然特性產(chǎn)生不利影響，從而改變它們的行為和體內(nèi)檢測(cè)到的動(dòng)力學(xué)。在此，我們提出了一種原位生物素化策略，用靜脈注射的DSPE-PEG生物素直接標(biāo)記循環(huán)sEV，旨在更生物友好和準(zhǔn)確地評(píng)估循環(huán)sEV的體內(nèi)動(dòng)力學(xué)。這種分析策略沒有隔離-標(biāo)記-再融合程序，對(duì)sEV的自然行為沒有不利影響。

結(jié)果顯示，小鼠中通用循環(huán)sEV的壽命約為3天。此外，我們首次揭示了不同細(xì)胞來源的循環(huán)sEV亞群的不同體內(nèi)動(dòng)力學(xué)，其中紅細(xì)胞來源的sEV壽命長。此外，與原位循環(huán)sEVs或用作自體移植相比，用作同種異體移植的循環(huán)sEVs的壽命短。

此外，原位生物素化策略還為生物素化循環(huán)sEVs的富集提供了一種方法�？傊�，本研究為循環(huán)sEV的原位標(biāo)記提供了一種新策略，這將有助于準(zhǔn)確表征其體內(nèi)動(dòng)力學(xué)，從而加速其作為生物標(biāo)志物和治療載體的未來應(yīng)用。

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