BSA-FITC（熒光素標(biāo)記牛血清白蛋白）合成制備

中文名稱：FITC標(biāo)記牛血清白蛋白
英文名稱：BSA-FITC（Bovine Serum Albumin-Fluorescein）
別名：FITC-BSA、熒光牛血清蛋白

供應(yīng)商：西安pg電子官方生物科技有限公司

用途：科研

一、反應(yīng)原理：

FITC（異硫氰酸熒光素）具有活潑的異硫氰酸基團(tuán)，可與蛋白質(zhì)賴氨酸殘基的氨基反應(yīng)，生成穩(wěn)定的硫脲鍵，從而將熒光團(tuán)共價(jià)連接至蛋白上。

二、原料準(zhǔn)備：

BSA：常用濃度為10 mg/mL，在0.1 M NaHCO?緩沖液中（pH 8.5）溶解；

FITC：在DMSO或乙醇中新鮮配制（常用濃度為1–10 mg/mL）；

緩沖液：0.1 M NaHCO?或PBS（pH 8.5）

三、合成步驟：

反應(yīng)配比

按BSA與FITC摩爾比1:3~1:10配制反應(yīng)體系（根據(jù)標(biāo)記密度需求調(diào)整）；

在避光條件下緩慢滴加FITC至BSA溶液中，并輕微攪拌。

孵育反應(yīng)

反應(yīng)通常在4°C或室溫避光下進(jìn)行4–12小時(shí)；

控制pH在8.0–8.5，有利于反應(yīng)效率，防止蛋白質(zhì)變性。

純化處理

反應(yīng)后需用透析袋（10 kDa）進(jìn)行48小時(shí)透析，更換PBS緩沖液3–4次以去除游離FITC；

也可使用凝膠層析柱（如Sephadex G-25）進(jìn)行分離。

檢測與儲(chǔ)存

用UV-VIS分光光度計(jì)測定FITC吸收峰（495 nm）與蛋白280 nm吸收比值，計(jì)算標(biāo)記密度（FITC/BSA）；

建議冷凍（-20°C）避光保存，加入0.01% NaN?防止微生物污染。

四、應(yīng)用與優(yōu)勢：

應(yīng)用：

細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)：用于示蹤蛋白質(zhì)攝取與分布；

免疫組化：作為非特異性對照蛋白；

熒光成像：觀察蛋白質(zhì)運(yùn)輸、血腦屏障通透性等；

載藥或納米材料示蹤：例如FITC-BSA納米粒；

優(yōu)勢：

熒光強(qiáng)度高，綠色可視化清晰；

BSA為天然蛋白，生物相容性優(yōu)；

標(biāo)記工藝成熟，重復(fù)性強(qiáng)。

關(guān)于我們：

西安pg電子官方生物提供的熒光標(biāo)記服務(wù)支持糖化學(xué)、蛋白質(zhì)、多肽、抗體、核酸及納米材料等多種生物分子的熒光化修飾�？商峁┒喾N熒光探針（如FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor系列、ICG等），根據(jù)應(yīng)用場景（流式細(xì)胞、共聚焦、活體成像等）選擇合適波長及標(biāo)記方式。服務(wù)包含標(biāo)記反應(yīng)、純化、標(biāo)記率評估及質(zhì)量驗(yàn)證，確保分子活性和信號(hào)強(qiáng)度。適用于細(xì)胞追蹤、分子成像、靶向驗(yàn)證等研究，亦可提供定制熒光強(qiáng)度、pH響應(yīng)或近紅外探針功能化服務(wù)。

以上資料由小編zhn提供，僅用于科研

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