文獻：近紅外激活仿生納米平臺用于*特異性藥物釋放、滲透和原位膠質(zhì)母細胞瘤的化學(xué)光熱協(xié)同*

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作者：李明，張新銳，周玉杰，褚玉騰，沉杰，蔡粵&孫宣榮

節(jié)選：

DSPE-PEG-Angiopep-2的合成

為合成 DEPE-PEG-Angiopep-2，將 5 毫克 DSPE-PEG-Mal 完全溶解于 10 毫升水中。然后，將 6 毫克 Angiopep-2-cys 加入溶液中，并在 37°C 下攪拌 12 小時。對溶液進行透析（分子量 3500），以去除過量的 Angiopep-2-cys。將所得純化產(chǎn)物 DSPE-PEG-Angiopep-2 冷凍干燥，并儲存于 ?20°C 以備后續(xù)使用。

巨噬細胞膜的分離：將RAW264.7細胞以2.5×10 7 個細胞·mL ?1的密度懸浮于冰冷的TM緩沖液（pH 7.4；10 mM Tris + 1 mM MgCl 2）中。隨后，在冰浴條件下通過超聲波破碎5分鐘來使細胞破碎。隨后將1 M蔗糖與細胞勻漿混合，最終達到0.25 M蔗糖濃度，將混合物在4°C下以2000 g離心約10分鐘。所得上清液在3000 g下進一步離心30分鐘后收集。引文43收集細胞膜，在含有0.25 M蔗糖的冰冷TM緩沖液中洗滌兩次以進行純化。引文44隨后，通過BCA蛋白測定法測得膜蛋白含量約為每30×106個細胞0.25毫克。提取的巨噬細胞膜隨后儲存在-20℃下保存。

NP、M-NP和AM-NP的制備：

ICG/SN-38 納米粒子 (NP) 的制備與之前報道一致，并進行了修改。引文45簡而言之，將 1 mg ICG 和 1 mg SN-38 溶于 20 μL DMSO 中，然后加入 1 mL 水，超聲處理 5 分鐘。將制劑對蒸餾水（1 L）透析（MW3500）12 小時。然后，將一定量的巨噬細胞膜與 NP 溶液超聲處理 2 分鐘，得到巨噬細胞膜/ICG/SN-38（M-NP）。此外，將 M-NP 和 100 μg DSPE-PEG-Angiopep-2 超聲處理（400 W，2 秒開/3 秒關(guān)，2 分鐘）得到 1 mL Angiopep-2 修飾的 M-NP（AM-NP）。

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