熒光標(biāo)記酶定制合成技術(shù)
一、技術(shù)簡(jiǎn)介
熒光標(biāo)記酶是將熒光染料通過(guò)共價(jià)鍵或非共價(jià)作用方式連接到酶分子上,以便對(duì)酶的分布、活性變化、底物結(jié)合行為等進(jìn)行可視化分析。這類標(biāo)記技術(shù)在酶催化動(dòng)力學(xué)研究、酶活監(jiān)測(cè)、生物成像、免疫檢測(cè)等方面具有廣泛應(yīng)用價(jià)值。
二、常用標(biāo)記策略
賴氨酸殘基標(biāo)記:使用NHS酯類熒光染料標(biāo)記酶表面賴氨酸殘基;
巰基標(biāo)記:Cys殘基較少的酶可通過(guò)馬來(lái)酰亞胺類染料實(shí)現(xiàn)特異性標(biāo)記;
底物或抑制劑導(dǎo)向標(biāo)記:使用結(jié)合活性中心的小分子進(jìn)行特異性熒光標(biāo)記;
位點(diǎn)特異突變標(biāo)記:通過(guò)定點(diǎn)突變引入標(biāo)記位點(diǎn),如Cys突變后特異性標(biāo)記。
三、常用熒光染料及特性
Alexa Fluor系列(AF488、AF647):高亮度、抗光漂白;
CyDye系列(Cy3、Cy5、Cy7):多通道成像;
Fluorescein、Rhodamine、BODIPY系列:適合常規(guī)標(biāo)記;
近紅外染料(如IRDye800CW):用于深層組織成像。
四、定制化合成內(nèi)容
提供不同pH/緩沖環(huán)境下穩(wěn)定的標(biāo)記方案;
保證酶活性不受標(biāo)記影響;
提供熒光標(biāo)記率與酶活殘留的測(cè)試報(bào)告;
支持單點(diǎn)、多點(diǎn)標(biāo)記,純化后HPLC/SEC驗(yàn)證。
五、應(yīng)用方向
酶活檢測(cè)與追蹤:標(biāo)記后的酶用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)速率;
靶向酶定位成像:觀察酶在細(xì)胞、組織內(nèi)分布;
高通量篩選:用于快速篩選抑制劑或底物;
免疫檢測(cè)系統(tǒng):如酶聯(lián)熒光免疫吸附法(ELFA)中應(yīng)用。
產(chǎn)地:西安pg電子官方生物
用途:科研
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西安pg電子官方生物科技有限公司專注于熒光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素類試劑、PEG衍生物、共聚物及光電功能材料的定制合成服務(wù)。公司擁有成熟的有機(jī)合成、生物合成與分子修飾平臺(tái),提供從結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)、工藝開發(fā)到純化表征的一站式定制方案。
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