Fluorescein Tyramide 是一種結(jié)合了熒光染料 熒光素(Fluorescein) 與 Tyramide Signal Amplification (TSA) 技術(shù)的熒光標(biāo)記試劑。它廣泛用于生命科學(xué)領(lǐng)域,尤其在需要檢測低豐度靶標(biāo)的實(shí)驗(yàn)中,如免疫組化(IHC)、免疫熒光(IF)、熒光原位雜交(FISH)、Western blot 等。
英文名 Fluorescein tyramide
CAS號(hào) 210236-90-1
分子量 495.49
分子式 C29H21NO7
化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)
1. Fluorescein(熒光素)
激發(fā)波長:約 490 nm
發(fā)射波長:約 515 nm(發(fā)綠色熒光)
優(yōu)點(diǎn):亮度高、量子產(chǎn)率高、易檢測、與多種設(shè)備兼容。
缺點(diǎn):對(duì)光敏感,相對(duì)容易光漂白;在某些組織中可能存在背景自發(fā)熒光。
2. Tyramide(酪胺)
苯酚類化合物,能被辣根過氧化物酶(HRP)催化活化。
活化后生成高度活潑的自由基,可與靶標(biāo)附近蛋白質(zhì)的酪氨酸殘基共價(jià)結(jié)合。
這種共價(jià)結(jié)合使信號(hào)牢固沉積在靶標(biāo)位置,帶來極高的信號(hào)放大效果。
應(yīng)用領(lǐng)域
免疫組化(IHC)與免疫熒光(IF)
檢測組織或細(xì)胞中的低表達(dá)蛋白質(zhì)。
在多重染色實(shí)驗(yàn)中與其他波長染料搭配使用。
熒光原位雜交(FISH)
放大探針信號(hào),實(shí)現(xiàn)高靈敏度核酸檢測。
應(yīng)用于基因定位、染色體異常檢測、拷貝數(shù)變異分析等。
Western blot
提高蛋白檢測靈敏度。
尤其在目標(biāo)蛋白豐度低時(shí)發(fā)揮關(guān)鍵作用。
細(xì)胞成像與組織成像
fluorescein 發(fā)射綠色熒光,適合常規(guī)熒光顯微鏡觀察。
適用于冷凍切片、石蠟切片或培養(yǎng)細(xì)胞。
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