ATTO 655-NHS Ester 是一種基于 ATTO 655 熒光染料的活性酯衍生物,用于與生物分子(如蛋白質(zhì)、體、寡核苷酸、多肽等)中伯胺基團(tuán)(–NH?)發(fā)生共價(jià)偶聯(lián)。
它屬于 遠(yuǎn)紅區(qū)熒光染料,具有光學(xué)性能,尤其在高端熒光成像、單分子檢測、超分辨顯微術(shù)(如 STED、PALM、STORM)及多重?zé)晒鈽?biāo)記等領(lǐng)域占有重要地位。
NHS 酯活性原理
NHS 酯(N-Hydroxysuccinimide ester)是一種高度活潑的;D(zhuǎn)移試劑,能快速與伯胺基團(tuán)發(fā)生反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵。這使得 ATTO 655-NHS Ester 能高效標(biāo)記多種生物分子,如:
蛋白質(zhì)(體、酶、受體)
多肽(尤其是具有游離 N 端的多肽)
氨基修飾的寡核苷酸(DNA、RNA)
氨基官能化的納米顆粒(如聚合物、量子點(diǎn)、磁珠等)
應(yīng)用領(lǐng)域
1. 高分辨率熒光顯微術(shù)
ATTO 655 是超分辨顯微術(shù)(如 STED、PALM、STORM)的熱門染料之一。它具備高光穩(wěn)定性、適合 STED 脫激發(fā)波長 (~775 nm),使得圖像分辨率可突破傳統(tǒng)衍射限。
2. 流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry)
遠(yuǎn)紅熒光探針適合用于多重流式分析,與綠色、橙紅色等波段熒光探針光譜分離度高,避免信號重疊。
3. 蛋白質(zhì)/體標(biāo)記
用于體偶聯(lián)后,可在免疫熒光染色、ELISA、Western blot 等實(shí)驗(yàn)中作為靈敏的檢測探針。
4. 核酸標(biāo)記與分子探針
ATTO 655-NHS 可標(biāo)記氨基修飾的寡核苷酸,用于 FISH、qPCR 探針、分子檢測傳感器及核酸折疊研究。
5. 單分子檢測(Single Molecule Detection)
ATTO 655 熒光信號強(qiáng)且閃爍效應(yīng)較小,是單分子成像領(lǐng)域的理想染料,適合追蹤單個生物分子運(yùn)動軌跡。
6. 活體成像(In vivo Imaging)
其遠(yuǎn)紅發(fā)射波長減少組織吸收和散射,適合淺層活體成像,尤其在小鼠實(shí)驗(yàn)中可用于檢測淺表組織信號。
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