Cyanine5-Lysozyme,熒光Cy5標(biāo)記溶菌酶的結(jié)構(gòu)合成
Cyanine5-Lysozyme 是通過將近紅外熒光染料Cyanine5(Cy5)標(biāo)記至溶菌酶(Lysozyme)分子上得到的熒光蛋白探針,具有雙重功能:既保留溶菌酶對細(xì)菌細(xì)胞壁的裂解活性,又可用于近紅外熒光成像。該探針應(yīng)用于細(xì)菌追蹤、細(xì)胞吞噬實驗、抗菌機制研究及藥物輸運監(jiān)測中。
合成該探針的關(guān)鍵在于染料與蛋白質(zhì)之間的共價偶聯(lián)。溶菌酶含有多個賴氨酸殘基,Cy5-NHS酯可與其自由胺基反應(yīng)形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)步驟如下:
緩沖液準(zhǔn)備:將溶菌酶溶于無胺緩沖液(如pH 8.0的PBS或碳酸鹽緩沖液),濃度控制在1–5 mg/mL,避免胺類緩沖液干擾。
Cy5活性酯加入:將Cy5-NHS溶于DMSO中緩慢滴加至溶菌酶溶液中,反應(yīng)在避光條件下室溫進行30–60分鐘。
去除未反應(yīng)染料:使用超濾或凝膠層析(如PD-10柱)去除游離Cy5。
驗證結(jié)構(gòu)與活性:通過吸收光譜與蛋白濃度比確定Dye/Protein比(通常1–3 mol/mol),通過溶菌酶抑菌活性測定確保標(biāo)記后仍保留功能。
表征:使用SDS-PAGE進行純度檢測,熒光掃描驗證染料結(jié)合,質(zhì)譜確認(rèn)分子量變化,紫外-可見吸收與熒光發(fā)射光譜確認(rèn)Cy5特征。
Cy5-Lysozyme 發(fā)射波長650–670 nm,具有良好的組織穿透性與成像分辨率?捎糜诨罴(xì)胞內(nèi)的溶菌酶追蹤,也可與納米載體復(fù)合,研究其在細(xì)胞吞噬、炎癥調(diào)控和抗菌中的動態(tài)分布行為。
產(chǎn)品名稱:Cyanine5-Lysozyme,熒光Cy5標(biāo)記溶菌酶
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機溶劑。
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
pg電子官方生物供應(yīng)近紅外熒光花菁染料標(biāo)記各種官能團的定制服務(wù),如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯(lián)。
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174961-75-2
僅供科研,不能用于人體實驗AXC.2025.06.23