文獻:熒光膽固醇類似物在分隔的質膜中的超快擴散
鏈接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/tra.12163
作者:平本山木奈緒, 田中健二, 鈴木健一, 廣澤晃一郎, 宮原真奈美, 齊亞·卡萊, 田中光一郎, 葛西林氏, 久住明弘, 藤原貴宏
節(jié)選:
人們對膽固醇在質膜 (PM) 中的分布和動力學了解甚少。*近開發(fā)的 Bodipy488 結合膽固醇分子 (Bdp-Chol) 使我們能夠使用單熒光分子成像研究 PM 中的膽固醇行為。令人驚訝的是,在完整的 PM 中,Bdp-Chol 的擴散速度是 PM 中所有分子中*快的,平均擴散系數(shù) ( D ) 為 3.4 ?m 2 /秒,大約是非筏磷脂分子 (0.33 ?m 2 /秒) 的 10 倍,盡管 Bdp-Chol 可能與筏結構域相關。此外,Bdp-Chol 在長于 0.5 毫秒的時間尺度上沒有表現(xiàn)出被捕獲的跡象。在起泡的 PM 中,肌動蛋白絲大量耗盡,Bdp-Chol 和 Cy3 共軛二油酰磷脂酰乙醇胺 (Cy3-DOPE) 以相當?shù)腄 s 擴散(中位數(shù)分別為 5.8 和 6.2 ?m 2 /秒),表明基于肌動蛋白的膜骨架僅將 Bdp-Chol 的D降低至起泡 PM 的約 2 倍,而將Cy3-DOPE 的D降低至約 20 倍。這些結果與之前提出的模型一致,其中 PM 由基于肌動蛋白的膜骨架圍欄及其相關的跨膜柵欄蛋白分隔,以對所有膜分子進行宏觀擴散,并表明 Bdp-Chol 一旦進入邊界,穿過隔間邊界的概率比 Cy3-DOPE 大約 10 倍。由于隔室尺寸大于假定的筏結構域的尺寸,我們得出結論,筏結構域與膜骨架誘導的隔室共存并包含在其中。
膽固醇被認為是質膜(PM)組織的關鍵分子。它可能與飽和烷基鏈形成化學計量復合物并與鞘磷脂和糖鞘脂形成氫鍵。同時,膽固醇不易與不飽和烷基鏈混溶,因為其剛性、龐大的四環(huán)固醇骨架與不飽和磷脂的剛性彎曲順式雙鍵之間不整合。因此,在膜中存在飽和烷基鏈時,膽固醇分子將從不飽和脂質結構域中分離出來,并與糖基磷脂酰肌醇( GPI)錨定蛋白、糖鞘脂和鞘磷脂的飽和烷基鏈形成(瞬時)復合物或結構域。由于這些特性,膽固醇被認為是 PM 中各種筏結構域以及人工膜雙層 中協(xié)同組裝的必需分子。
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