Annexin V-AF488,熒光標(biāo)記的蛋白質(zhì)探針的化學(xué)結(jié)構(gòu)
Annexin V-AF488 是一種熒光標(biāo)記的蛋白質(zhì)探針,用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡過程中磷脂酰絲氨酸(PS)的外翻現(xiàn)象。其由來源的 Annexin V 蛋白與 Alexa Fluor 488 熒光染料共價(jià)偶聯(lián)構(gòu)成,在細(xì)胞生物學(xué)與藥物篩選中具有應(yīng)用。
其化學(xué)結(jié)構(gòu)主要由以下兩部分組成:
Annexin V 蛋白結(jié)構(gòu)
Annexin V 是一種35–36 kDa的鈣離子依賴性蛋白,可特異性結(jié)合細(xì)胞膜外翻的PS。該蛋白本身具有高度折疊的 α-螺旋結(jié)構(gòu),穩(wěn)定性強(qiáng),并保留鈣離子結(jié)合位點(diǎn)。其PS結(jié)合特性是檢測(cè)早期凋亡細(xì)胞的經(jīng)典機(jī)制。
AF488 染料結(jié)構(gòu)
Alexa Fluor 488 是一種綠色熒光染料,激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約為495/519 nm。其結(jié)構(gòu)屬于羧基熒光素類,經(jīng)化學(xué)修飾形成NHS酯后與Annexin V表面賴氨酸殘基反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵。AF488具有出色的光穩(wěn)定性、低背景和水溶性,非常適合活細(xì)胞標(biāo)記。
偶聯(lián)方式
AF488通常以NHS酯形式與Annexin V反應(yīng),保持其原有功能結(jié)構(gòu)。偶聯(lián)反應(yīng)通常在pH 7.2–8.0的緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,避免使用含胺類緩沖液(如Tris)。
構(gòu)象及功能保持
在偶聯(lián)過程中,通過控制染料與蛋白的摩爾比,可避免影響Annexin V的結(jié)合活性,通常保持2–3個(gè)染料/蛋白即可獲得良好信號(hào)。
Annexin V-AF488 保持蛋白與膜PS的高親和結(jié)合能力,同時(shí)具備熒光染料的可視化功能
產(chǎn)品名稱:Annexin V-AF488
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機(jī)溶劑。
儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
pg電子官方生物供應(yīng)近紅外熒光花菁染料標(biāo)記各種官能團(tuán)的定制服務(wù),如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價(jià)偶聯(lián)。
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