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          Cy3/5/7標記PE藻紅蛋白,Cyanine5-PE/CY5-PE的組成與化學結構
          發(fā)布時間:2025-07-22     作者:wyh   分享到:

          產品名稱:Cy3/5/7標記PE藻紅蛋白,Cyanine5-PE/CY5-PE的組成與化學結構

          一、結構特性

          1. 組成與化學結構

          藻紅蛋白(PE):

          天然熒光蛋白,分子量約240,000 Da,由α、β亞基(各約20,000 Da)和γ亞基(約30,000 Da)組成,通過硫醚鍵連接開鏈線性四吡咯化合物。

          熒光特性:吸收峰565 nm,發(fā)射峰578 nm,熒光強度是熒光素的30-100倍,量子產率高,光穩(wěn)定性好。

          生物學功能:天然熒光探針,可用于免疫檢測、流式細胞術及光動力治療(因能產生單線態(tài)氧)。

          Cy5染料:

          近紅外花菁染料,激發(fā)波長650 nm,發(fā)射波長670 nm,含共軛多環(huán)芳香體系,具有高熒光強度和低背景干擾。

          Cy5-PE復合物:

          結合方式:Cy5通過共價鍵(如NHS酯與PE的氨基反應)與PE結合,形成穩(wěn)定的熒光標記蛋白。

          光譜特性:支持多色標記(PE激發(fā)565 nm/發(fā)射578 nm,Cy5激發(fā)650 nm/發(fā)射670 nm)。

          Cy3/5/7標記PE藻紅蛋白,Cyanine5-PE/CY5-PE

          二、合成方法

          1. 主要合成步驟

          PE的純化:

          從紅藻中提取并純化PE,確保高純度(A565/A280>5.5)。

          Cy5的活化:

          使用NHS酯或異硫氰酸酯活化Cy5的羧酸基團。

          偶聯(lián)反應:

          在pH 8.0-9.0的緩沖液中,將活化后的Cy5與PE的氨基反應,形成共價鍵。

          純化:

          通過透析或色譜法去除未反應的Cy5,得到Cy5-PE復合物。

          儲存:

          避光干燥條件下,-4℃可穩(wěn)定保存12個月。

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          Cy3/5/7標記PE藻紅蛋白,Cyanine5-PE/CY5-PE

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