點擊化學(xué)又稱“鏈接化學(xué)”或“動態(tài)組合化學(xué)”，指在通過小單元的拼接，來快速、可靠地完成各種類型分子的化學(xué)合成。該反應(yīng)尤其強調(diào)開辟以碳-雜原子鍵（C-X-C）合成為基礎(chǔ)的組合化學(xué)新方法，其代表反應(yīng)為銅催化的疊氮-炔基的環(huán)加成反應(yīng)。點擊化學(xué)反應(yīng)有如下優(yōu)點：

（1）可在細胞內(nèi)發(fā)生，利于原位直接找到**作用靶點；

（2）合成反應(yīng)快速、副產(chǎn)物對細胞無**；

（3）操作簡單、條件溫和、對水與氧等環(huán)境。

通過有機合成的方式在活性分子上引入炔烴等生物正交基團，在不影響其藥理活性的前提下合成得到功能化衍生物，隨后將該功能化衍生物與細胞共孵育，使其與靶標蛋白結(jié)合，利用點擊反應(yīng)再將疊氮修飾的報告基團（生物素或熒光）連接到探針-靶標蛋白復(fù)合物上，進而對靶標進行檢測、富集和鑒定（圖1）

采用點擊化學(xué)的方式進行靶點鑒定，通常需要3個步驟，具體包括：

（1）小分子探針的設(shè)計與合成，隨后將該探針與細胞共孵育后實現(xiàn)與靶蛋白的特定位點發(fā)生共價結(jié)合；

（2）通過點擊化學(xué)反應(yīng)，將已與靶蛋白發(fā)生共價結(jié)合的分子探針與報告基團相連（圖2）；

（3）對所識別的靶標進行純化、富集和鑒定

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