量子點(diǎn)是一種新型的半導(dǎo)體納米晶體材料。作為一種熒光標(biāo)記探針,它展現(xiàn)出傳統(tǒng)熒光染料所沒(méi)有的許多光化學(xué)優(yōu)點(diǎn)。**,量子點(diǎn)具有寬的吸收光譜,窄而對(duì)稱(chēng)的發(fā)射光譜,可以實(shí)現(xiàn)單波長(zhǎng)同時(shí)激發(fā)不同量子點(diǎn);其次量子點(diǎn)光化學(xué)穩(wěn)定性強(qiáng),經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間光源照射熒光特性不受損失,抗光漂白性能強(qiáng)。近年來(lái),量子點(diǎn)在基因分析、免疫分析、微生物檢測(cè)等方面得到應(yīng)用。
本文的主要工作是將鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)分別引入到基因芯片技術(shù)與聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)之中,建立了鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)標(biāo)記的基因芯片檢測(cè)平臺(tái),同時(shí)探討了鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)對(duì)于聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的影響作用。
本文的研究?jī)?nèi)容主要包括以下幾個(gè)環(huán)節(jié):
一.鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)標(biāo)記的基因芯片檢測(cè)系統(tǒng)的優(yōu)化研究
本文研究以針對(duì)細(xì)菌16SrRNA基因?yàn)闄z測(cè)靶基因設(shè)計(jì)的寡核苷酸探針做為本次研究的檢測(cè)探針。探針以一定的方式固定在醛基化的載玻片上,制成基因芯片。利用針對(duì)16SrRNA基因的通用引物對(duì)靶基因進(jìn)行擴(kuò)增,同時(shí)將擴(kuò)增產(chǎn)物標(biāo)記上生物素,標(biāo)記了生物素的擴(kuò)增產(chǎn)物與寡核苷酸基因芯片在適當(dāng)?shù)臈l件下雜交,雜交后的基因芯片經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理后,應(yīng)用鏈酶親和素連接的CdSe/ZnS量子點(diǎn)進(jìn)行標(biāo)記,標(biāo)記后的基因芯片經(jīng)過(guò)處理之后,應(yīng)用基因芯片掃描儀檢測(cè)雜交結(jié)果,在本文中,我們對(duì)鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)標(biāo)記的基因芯片檢測(cè)系統(tǒng)的雜交體系進(jìn)行了優(yōu)化研究,
二.鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)標(biāo)記的基因芯片檢測(cè)系統(tǒng)的效能評(píng)價(jià)
基因芯片檢測(cè)系統(tǒng)的基本參數(shù)包括了特異性、敏感性、重復(fù)性、等指標(biāo),這些參數(shù)反應(yīng)了基因芯片檢測(cè)系統(tǒng)的基本性能,在本部分實(shí)驗(yàn)中我們對(duì)建立的量子點(diǎn)標(biāo)記的基因芯片檢測(cè)系統(tǒng)針對(duì)以上參數(shù)進(jìn)行了評(píng)估,將CdSe/ZnS量子點(diǎn)融入到現(xiàn)有的基因芯片檢測(cè)技術(shù)之中,建立了鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)標(biāo)記的基因芯片技術(shù)方法,為了評(píng)估該方法的檢測(cè)效能,我們對(duì)該方法的特異性指標(biāo)、敏感性指標(biāo)、以及重復(fù)性指標(biāo)進(jìn)行了考查。
三.鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)標(biāo)記的基因芯片檢測(cè)系統(tǒng)初步應(yīng)用
為了測(cè)試實(shí)驗(yàn)所建立的,鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)標(biāo)記基因芯片在實(shí)際樣品中的潛在應(yīng)用能力,我們將建立的鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)標(biāo)記的基因芯片應(yīng)用于檢測(cè)從食品中分離的菌株。
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以上資料來(lái)自小編axc,2022.03.07
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