近年來,量子點在基因分析、免疫分析、微生物檢測等方面得到應(yīng)用。將鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點分別引入到基因芯片技術(shù)與聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)之中,建立了鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記的基因芯片檢測平臺,
本文的研究內(nèi)容主要包括以下幾個環(huán)節(jié):
1.鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記的基因芯片檢測系統(tǒng)的優(yōu)化研究
鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記取特定濃度的鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點與寡核苷酸芯片的探針陣列區(qū)域在室溫下孵育--定時間。鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記后的芯片的處理方法將標(biāo)記后的寡核苷酸芯片放入以下洗液中分別漂洗特定的時間。
鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記的基因芯片雜交體系的優(yōu)化
(1)雜交液的選擇
以金黃色葡萄球菌為例,比較了進(jìn)口雜交液,與自行配制雜交液的雜交情況。
(2)雜交條件的優(yōu)化
對影響寡核苷酸芯片雜交的4個主要因素雜交溫度、雜交時間、洗滌條件、鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點濃度進(jìn)行了選擇優(yōu)化,采用正交設(shè)計來安排實驗。
2。鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記的基因芯片檢測系統(tǒng)的效能評價;
通過實驗研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)過量子點的標(biāo)記之后,得到相應(yīng)的雜交圖譜。歸納雜交圖,得到量子點標(biāo)記的基因芯片檢測食源性致病細(xì)菌的**雜交圖譜。圖10給出的圖片是掃描程序生成的原始圖像。程序自動將單色熒光信號轉(zhuǎn)換為代表不同熒光強(qiáng)度的不同顏色,圖像中熒光強(qiáng)度與顏色的對應(yīng)關(guān)系由弱到強(qiáng)的依次是黑、藍(lán)、綠、黃、紅、白。
3。鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記的基因芯片檢測系統(tǒng)初步應(yīng)用。
鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點作為熒光標(biāo)記物質(zhì)的基因芯片技術(shù)方法,為敏感和特異地檢測食品樣本中可能存在的致病細(xì)菌,提供了一條新的途徑,為基因芯片技術(shù)檢測致病細(xì)菌,增添了新的內(nèi)容。
以鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點做為標(biāo)記物質(zhì)的基因芯片技術(shù),目前的檢測對象還主要是集中在標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌菌株,和食品中分離菌株的純培養(yǎng),由于一些客觀條件的限制,對建立的方法大規(guī)模驗證,還沒有全面展開。我們對鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記的基因芯片的重復(fù)性也進(jìn)行了評價,結(jié)果顯示,鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點標(biāo)記的基因芯片檢測平臺重復(fù)性良好。
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量子點定制產(chǎn)品目錄:
L-半胱氨酸(L-Cys)和巰基丙酸(MPA)共修飾CdTe量子點
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以上資料來自小編axc,2022.03.08
以上文中提到的產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體。