熒光標(biāo)記微球定制技術(shù)
一、概述
熒光微球廣泛應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡追蹤、免疫診斷、生物傳感器和藥物載體可視化。其核心是將熒光分子穩(wěn)定引入微球體系(如PS、PLGA、硅膠微球等)中。
二、定制技術(shù)流程
1. 微球基材選擇
聚苯乙烯(PS)微球:易表面功能化
PLGA微球:生物可降解
硅膠微球:化學(xué)穩(wěn)定、親水
2. 熒光染料標(biāo)記方式
包埋法:將FITC、Rhodamine B等混入微球成核或溶脹溶劑中
表面共價(jià)修飾法:
表面有–COOH、–NH?等官能團(tuán)
熒光分子如FITC、Cy5通過NHS、EDC方式結(jié)合
3. 制備工藝
溶劑擴(kuò)散法
溶脹-交聯(lián)包埋法
表面偶聯(lián):EDC/NHS或Mal-Cys反應(yīng)系統(tǒng)
4. 純化與封裝效率檢測(cè)
離心、透析去除游離染料
熒光強(qiáng)度測(cè)定標(biāo)記效率
TEM、SEM、DLS檢測(cè)粒徑和分布
三、應(yīng)用
熒光編碼微球用于多重檢測(cè)系統(tǒng)
可視化藥物遞送微球
標(biāo)記微球用于細(xì)胞攝取、分選實(shí)驗(yàn)
四、推薦試劑
名稱 | 功能 |
聚苯乙烯/PLGA微球 | 熒光標(biāo)記基材 |
FITC, Cy3, Cy5, Rhodamine B | 熒光染料 |
EDC/NHS, DMSO | 偶聯(lián)系統(tǒng) |
超濾管/離心管 | 純化分離工具 |
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