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          熒光標(biāo)記氨基酸定制技術(shù)-西安pg電子官方生物
          發(fā)布時(shí)間:2025-07-04     作者:zhn   分享到:

          熒光標(biāo)記氨基酸定制技術(shù)

          一、概述

          氨基酸的熒光標(biāo)記廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)動(dòng)態(tài)追蹤、代謝示蹤、酶活分析、信號(hào)路徑研究等。通過對(duì)天然氨基酸或其衍生物進(jìn)行熒光修飾,可構(gòu)建熒光探針、標(biāo)記底物或模擬肽鏈。


          二、定制技術(shù)流程

          1. 氨基酸前體選擇

          天然氨基酸如:Lys(有–NH?)、Cys(有–SH)、Asp/Glu(有–COOH)

          衍生化氨基酸(Fmoc-AAs、Boc-AAs等)

          2. 熒光染料與連接方式

          FITC → 反應(yīng)Lys上的–NH?

          NHS-Rhodamine/Cy5 → 胺基偶聯(lián)

          Maleimide類熒光染料 → 與Cys-SH反應(yīng)

          EDC/NHS法 → 用于氨基與羧基之間的偶聯(lián)

          3. 反應(yīng)條件

          水或DMF體系反應(yīng)

          pH控制在 7.4–8.5 之間

          反應(yīng)時(shí)間:1~12小時(shí),避光

          4. 純化與分析

          純化方式:透析、HPLC、層析

          分析方法:MALDI-TOF、熒光光譜、NMR、MS


          三、應(yīng)用

          熒光氨基酸用于體內(nèi)代謝示蹤

          熒光氨基酸修飾多肽構(gòu)建FRET探針

          蛋白質(zhì)定向修飾或活性檢測(cè)


          四、推薦試劑

          試劑

          功能

          FITC、NHS-Cy5

          主流熒光標(biāo)記物

          L-Lysine、Cys、Fmoc-Lys(Boc)-OH

          常用氨基酸底物

          DMF、HEPES

          溶劑體系

          EDC、NHS

          酰胺鍵催化劑

           

          熒光標(biāo)記氨基酸定制技術(shù)

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